Квантіфероновий тест (QuantiFERON®-ТВ Gold) – це сучасний лабораторний тест, який дозволяє виявити туберкульоз в латентній (прихованій) і активній стадії.
* Приймаємо аналіз щодня за попереднім записом
Туберкульоз – небезпечне інфекційне захворювання, викликане мікобактеріями туберкульозу. Мікобактерії туберкульозу можуть вражати всі органи і системи організму, частіше страждають органи дихання, тому виділяють дві форми туберкульозу: легенева і позалегеневий .
При легеневій формі уражаються легені і бронхи, при позалегеневого формі: травна система (частіше дистальний відділ тонкого кишечника і сліпа кишка); сечостатева система (нирки, сечовивідні шляхи, статеві органи у жінок: матка, труби, придатки, у чоловіків: простата, яєчка); нервова система (головний, спинний мозок); опорно-рухова система (кістки, частіше уражається хребет, суглоби); шкіра, очі та ін.
Основний шлях передачі бактерії туберкульозу, є повітряно-крапельний, який здійснюється при розмові, кашлі або чханні хворої людини, саме цей шлях зараження призводить до легеневої формі туберкульозу.
Найчастіше після інфікування захворювання протікає латентно (приховано), і лише у деяких, при певних змінах в організмі переходить в активну стадію.
Своєчасна діагностика туберкульозу – це єдина можливість не допустити переходу латентної стадії захворювання в активну у інфікованих людей, і захистити здорових людей від інфікування, шляхом виявлення заражених.
Розберемо по поличках скринінгові специфічні методи діагностики туберкульозу: на сьогоднішній день існує 2 групи.
- 1 група – це шкірні тести, сюди відноситься проба Манту і Діаскін тест.
- 2 група – це IGRA-тести, лабораторні дослідження туберкульозу по крові людини, до них відносяться ТІЛЬКИ: Квантіфероновий тест і T-SPOT.TB (т-спот).
ЗВЕРНІТЬ УВАГУ! ПЛР діагностика туберкульозу не підходить для скринінгу виявлення туберкульозу, тому що для цього методу необхідний матеріал з ВОГНИЩА передбачуваного туберкульозу.
ПЛР крові на мікобактерію туберкульозу, буде позитивна при туберкульозному сепсисі (зараження крові) і дисемінованому туберкульозі (найважчі форми туберкульозу). В інших випадках результат буде негативний, але це не означає, що людина не інфікована туберкульозом.
ПЛР діагностика використовується для швидкої діагностики відкритих і закритих форм туберкульозу, наприклад у людини виставлений діагноз туберкульоз легенів, необхідно зрозуміти, небезпечний він для оточуючих чи ні, береться мокрота і визначається збудник в мокроті.
ПЛР позитивна (рис.2) – туберкульозна паличка виділяється при чханні, кашлі, розмові, заражена людина становить небезпеку для оточуючих. ПЛР негативна (рис.1) – туберкульозний вогнище не повідомляється з бронхом, людина не виділяє туберкульозну паличку в навколишнє середовище, але при цьому він заражений туберкульозом і потребує лікування!
Тому даний метод не використовується для скринінгової діагностики туберкульозу, тому що він не може виключити або підтвердити факт інфікування туберкульозом.
ПОРІВНЯЛЬНА ТАБЛИЦЯ скринінгових МЕТОДІВ ДІАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЬОЗУ
| Реакція Манту | Діаскін тест | Квантіфероновий тест | T-SPOT.TB | |
| метод дослідження | шкірний тест | шкірний тест | Аналіз крові з вени | Аналіз крові з вени |
| побічні реакції | можливі | можливі | немає | немає |
| Протипоказання | є | є | немає | немає |
| оцінка результату | суб’єктивна | суб’єктивна | об’єктивна | об’єктивна |
| Хибнопозитивний результат після БЦЖ | часто | відсутній | відсутній | відсутній |
| Виявляє стадію туберкульозу | активну | активну | Латентну та активну | Латентну та активну |
| Використання при вагітності | заборонено | заборонено | дозволено | дозволено |
| Використання при гострих захворюваннях | заборонено | заборонено | Дозволено, але не рекомендується, оптимально через 1 міс після одужання | Дозволено, але не рекомендується, оптимально через 1 міс після одужання |
| Під час карантину | заборонено | заборонено | дозволено | дозволено |
| Ціна | Безкоштовно в поліклініці | Безкоштовно в поліклініці | 4950 рублів | 5990 рублів |
ПОРІВНЯННЯ КВАНТІФЕРОНОВОГО ТЕСТА І Т-СПОТ
Квантіфероновий тест, також як і T-SPOT відноситься до IGRA-тестів (interferongammareleaseassay), головна відмінність в тому, що квантіфероновий тест визначає гамма-інтерферон із сенсибілізованих Т-лімфоцитів, а Т-СПОТ визначає самі сенсибілізовані Т-лімфоцити, які виробляють гамма інтерферон на рекомбінантні протеїни ESAT-6 і CFP-10, в крові у інфікованої мікобактеріями туберкульозу людини.
| діагностичний тест | T-SPOT.TB | Квантіфероновий тест |
| Термін виконання | 1-2 робочих дня | 1-3 робочих дня |
| Методика дослідження заснована на стимуляції Т-клітин пептидами ESAT-6 і CFP-10 антигенів | Хибно позитивні результати на БЦЖ-вакцинацію відсутні | Хибно позитивні результати на БЦЖ-вакцинацію відсутні |
| оцінка результату | Визначається кількість сенсибілізованих Т-лімфоцитів , що виділяють гамма-інтерферон на ESAT-6 і CFP-10 антигени | Визначається сам гамма-інтерферон із сенсибілізованих Т-лімфоцитів на стимуляцію пептидними антигенами ESAT-6 і CFP-10 |
| Стандартизація за кількістю лімфоцитів | є | немає |
| Диференціація між латентної і активної стадією туберкульозу | немає | немає |
| Вплив прийнятих лікарських препаратів на тест | немає | є |
| Точність при імуносупресії (в т.ч. ВІЛ) | висока | Висока, але можуть бути помилково негативні результати при вираженому зниженні лімфоцитів |
| Чутливість тесту від віку пацієнта | Практично не змінюється | Знижується після 30 років |
| Застосування у дітей | обмежень немає | Рекомендований з 5 років |
| Матеріал для дослідження | венозна кров | венозна кров |
| Підготовка до дослідження | Не вимагається. Взяття крові проводиться натщесерце або не раніше, ніж через 4 години після необильного прийому їжі. Припустимо пити чисту немінерального і негазовану воду. Чай, кава, сік забороняються. | Не вимагається. Взяття крові проводиться натщесерце або не раніше, ніж через 4 години після необильного прийому їжі. Припустимо пити чисту немінерального і негазовану воду. Чай, кава, сік забороняються. |
ПРИНЦИП КВАНТІФЕРОНОВОГО ТЕСТА:
Показання для ДОСЛІДЖЕННЯ:
- Профілактичне обстеження дітей з 5 років, які відвідують дитячі садки та навчальні установи.
- У разі протипоказання проведення шкірних тестів: алергічні захворювання, шкірні захворювання, епілепсія, гострі захворювання і загострення хронічних;
- У разі токсико-алергічних реакцій на туберкулін, який входить в пробу Манту;
- У дітей, щеплених БЦЖ, у яких виявлена хибнопозитивна реакція Манту;
- У людей, що відвідали країни з високим рівнем захворюваності на туберкульоз (Африка, Азія);
- Обстеження вагітних у разі контакту з хворим на туберкульоз або наявності симптомів;
- У осіб, що контактують з туберкульозними хворими;
- У пацієнтів на ФНО-ɣ терапії;
- У ВІЛ-інфікованих;
- При підозрі на позалегеневий форми туберкульозу.
КВАНТІФЕРОНОВИЙ ТЕСТ є альтернативою пробі Манту, згідно з клінічними рекомендаціями, затвердженими Російським товариством фтизіатрів і Міністерством охорони здоров’я РФ, «Виявлення та діагностика туберкульозу у дітей, що надходять і навчаються в освітніх організаціях» (Москва, 2017 р .; стор. 14)
КВАНТІФЕРОНОВИЙ ТЕСТ переважно замінити НА T-SPOT.TB, ЯКЩО:
- пацієнт приймає препарати пригнічують вироблення гамма-інтерферону (глюкокортикоїди);
- пацієнт приймає препарати знижують рівень лейкоцитів: група НПЗЗ (аспірин, парацетамол, найс, кеторол і ін.), цитостатики і т. д .;
- пацієнт з вираженим імунодефіцитом пов’язаним зі зниження рівня лімфоцитів, в тому числі ВІЛ-інфекція;
- пацієнт до 5 років і в літньому вік;
так як це дозволить уникнути помилково негативні результати, тим самим не дасть пропустити зараження туберкульозом. У всіх інших випадках Квантіфероновий тест не поступається T-SPOT.TB і дає таку ж надійність та інформативність.
ІНТЕРПРЕТАЦІЯ КВАНТІФЕРОНОВОГО ТЕСТА
| позитивний | Сумнівний / Невизначений | негативний |
!!! необхідна консультація фтизіатра !!! |
Сумнівний результат, вимагає контрольного дослідження через 4-8 тижнів, може відображати початковий етап зараженіяНеопределенний результат пов’язаний з недостатньою функціональною активністю Т-лімфоцитів. Рекомендовано повторити дослідження через 2-4 тижні. |
|
Помилково негативні результати:
|
Звертаємо Вашу увагу на те, що інтерпретація результатів досліджень, встановлення діагнозу, а також призначення лікування, відповідно до Федерального закону ФЗ № 323 «Про основи захисту здоров’я громадян у Російській Федерації», повинні проводитися лікарем відповідної спеціалізації.
Шушакова Катерина Костянтинівна
Приклади РЕЗУЛЬТАТІВ ДОСЛІДЖЕННЯ:
Квантіфероновий тест (діагностика туберкульозу)
КВАНТІФЕРОНОВИЙ ТЕСТ (QuantiFERON®-ТВ Gold) – сучасний лабораторний тест для виявлення туберкульозної інфекції, альтернатива класичним шкірним тестом з туберкуліном. На даний момент в різних країнах розроблено та випущено велику кількість національних рекомендацій щодо застосування даного тесту.
Квантіфероновий тест заснований на визначенні INF-γ (гамма-інтерферону), що вивільняється сенсибілізованими Т-клітинами, стимульований in vitro специфічними протеїнами (ESAT-6, CFP-10, TB7.
7 (p4)) мікобактерій туберкульозу, що входять в комплекс Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis, M. bovis, M. canettii, M. caprae, M. pinnipedii, M. mungi, M. microti, M. africanum і ін.) . Ці протеїни відсутні в вакцинних штамах M.
bovis BCG і в більшості нетуберкульозних мікобактерій, за винятком M. kansasii, M. szulagai, M. marinum.
У досліджуваної крові пацієнта (з пробірки з ТВ-антигеном) визначається зміст INFγ, результат аналізується в сукупності з даними, отриманими з 2-х інших пробірок (виконують роль контрольних).
Приблизно 1/3 частина населення світу інфікована МБТ, і тільки у 5-10% інфікованих осіб розвивається захворювання.
При наявності несприятливих факторів латентна туберкулезаня інфекція (ЛТИ – стан, коли мікобактерії туберкульозу (МБТ) присутні в організмі людини, але при цьому відсутні клінічні і рентгенологічні ознаки туберкульозу) може перейти в активну форму з розвитком позалегеневого туберкульозу (наприклад, туберкульоз нирок).
До групи високого ризику інфікування МБТ відносяться особи, які мали контакт з хворим на туберкульоз, або мають високу ймовірність контакту (працівники протитуберкульозних диспансерів, притулків, виправних установ і ін.), А також особи з супутніми захворюваннями (ВІЛ-інфекцією, цукровий діабет та ін. ).
Використовувані для діагностики ЛТИ шкірні тести – проба Манту і Діаскінтест®, мають ряд протипоказань і обмежень до застосування.
Протипоказання до проведення проби Манту і Діаскінтест:
- Індивідуальна непереносимість туберкуліну;
- Гострі і хронічні інфекційні захворювання і соматичні захворювання в період загострення;
- Шкірні захворювання і алергічні стани в період загострення;
- Період карантину в дитячих колективах.
У пацієнтів з індивідуальною гіперчутливістю до туберкуліну може спостерігатися хибнопозитивна реакція.
Порівняння тестів для діагностики туберкульозної інфекції
Параметр Проба Манту Діаскінтест® Квантіфероновий тест
| метод дослідження | шкірний тест | шкірний тест | дослідження крові |
| побічні реакції | можливі | можливі | немає |
| Протипоказання | є | є | немає |
| специфічність | низька | висока | висока |
| Хибно позитивні результати після вакцинації БЦЖ | Так | немає | немає |
| Залежність від термінів проведення профілактичних щеплень | Так (не раніше ніж через місяць) | Так (не раніше ніж через місяць) | немає |
| інтерпретація результатів | суб’єктивна | суб’єктивна | об’єктивна |
Переваги КВАНТІФЕРОНОВОГО ТЕСТА:
- відсутність протипоказань і обмежень за часом проведення;
- відсутність хибнопозитивних результатів в разі вакцинації БЦЖ;
- безпеку процедури і відсутність побічних реакцій;
- інтерпретація результатів цього тесту менш суб’єктивна, ніж інтерпретація результатів шкірних туберкулінових тестів;
- висока специфічність (99,1%) і висока чутливість (89,0%).
Показання до призначення КВАНТІФЕРОНОВОГО ТЕСТА:
- Виявлення ЛТИ в групах високого ризику: працівники спеціалізованих протитуберкульозних та інших установ, де є високий ризик контакту зі збудником або хворим на туберкульоз, пацієнти з супутніми захворюваннями і ін .;
- Наявність відомих контактів з хворим на туберкульоз (бактеріовидільником);
- Наявність позитивної реакції проби Манту для виключення поствакцинальной реакції;
- Наявність протипоказань до проведення шкірних туберкулінових проб (проби Манту і Діаскінтеста®);
- Диференціальна діагностика інфекцій, викликаних МБТ;
- Обстеження іммігрантів.
Приклад результату дослідження і інтерпретація:
| Примітка: Даний тест не диференціює латентний і активний туберкульоз. У разі позитивного результату необхідно проконсультуватися з лікарем-фтизіатра для визначення подальшої тактики. Величина рівня гамма-інтерферону не корелює зі стадією і ступенем інфікування, рівнем імунної реактивності або ймовірністю переходу латентного туберкульозу в активний.
Параметр Результат Критерії оцінки результатів
Інтерпретація результатів QFT: Негативний – ймовірність інфекції М.tuberculosis complex відсутня. Позитивний – інфекція M.tuberculosis complex імовірна. Сумнівний – в силу чутливості до TB-антигену. |
Інтерпретація результату дослідження
Позитивний результат Сумнівний результат Негативний результат
|
У цьому випадку лікар приймає рішення або на користь забору нового зразка крові, або на користь проведення інших медичних обстежень. |
Помилково негативні результати можуть бути:
|
Увага! Інтерпретація результатів повинна проводитися з урахуванням клініко-епідеміологічного анамнезу і результатів інших діагностичних досліджень.
- Метод дослідження: твердофазного імуноферментного аналізу.
- Матеріал для дослідження: кров (спеціальний комплект з трьох пробірок, який використовується тільки для проведення дослідження «Квантіфероновий тест»).
- Термін виконання дослідження: 3-10 робочих днів.
- Підготовка до проведення дослідження: забір крові проводять вранці строго натщесерце (або не раніше, ніж через 8 годин після останнього прийому їжі).
- У лабораторію CMD доставляються всі 3 пробірки, поміщені в пакет «Комплект пробірок для Квантіферонового тесту»!
Квантіфероновий тест QuantiFeron-TB – іммунодіагностіка туберкульозної інфекції (QuantiFERON-TB Gold, QFT) – довідатися про ціни на аналіз і здати в Москві
Метод визначення Твердофазний імуноферментний аналіз.
Досліджуваний матеріал Цілісна кров (літій-гепарин)
Доступний виїзд на будинок
Туберкульоз – інфекційне хронічне захворювання, яке викликається мікобактеріями туберкульозу (Mycobacterium tuberculosis complex). Активний туберкульоз розвивається приблизно у 10% людей, інфікованих M. tuberculosis.
В інших випадках завдяки імунній системі відбувається елімінація збудника з організму або розвивається латентна туберкульозна інфекція (ЛТИ).
При ЛТИ мікобактерії персистируют в організмі в неактивному стані, обумовлюючи стійкий імунна відповідь на антигени збудника при відсутності клінічних проявів активної форми захворювання.
Діагностика активного туберкульозу грунтується на вивченні клінічних і радіографічних даних в сукупності з результатами прямого мікроскопічного дослідження, виділення культури Mycobacterium tuberculosis, ПЛР-досліджень.
Діагностика латентної інфекції утруднена відсутністю клінічних та рентгенологічних ознак захворювання, а також відсутністю збудника в пробах доступного біоматеріалу. Однак її виявлення важливо для визначення осіб, які потребують постійному контролі й превентивної терапії.
В даний час існують два методи виявлення можливої латентної інфекції:
- in vivo: внутрішньошкірні тести з очищеним або рекомбінантним туберкульозним алергеном (проба Манту, Діаскінтест);
- in vitro: дослідження проб крові для оцінки відповіді імунних клітин обстежуваного на антигени мікобактерій туберкульозу по вивільненню гамма-інтерферону (IGRA-тести).
Обидва підходи засновані на оцінці характеру імунної реакції людини на антигени збудника, т. Е. Не є методами прямого виявлення інфекційного агента.
Відповідно до клінічними рекомендаціями МОЗ РФ і Російського товариства фтизіатрів щодо виявлення та діагностики туберкульозу у дітей, що надходять і навчаються в освітніх організаціях (2017), квантіфероновий тест є альтернативним внутрішньошкірним пробам методом обстеження на туберкульозну інфекцію.
Квантіфероновий тест (QuantiFERON-TB Gold) заснований на вимірюванні продукції INF-γ (гамма-інтерферону).
Вироблення гамма-інтерферону здійснюється сенсибілізованими Т-клітинами крові пацієнта, стимульований in vitro специфічними для мікобактерій туберкульозу антигенами: закодовані регіоном RD 1 (region of difference) – ESAT-6 (early secreted antigenic target – ранній секретується антиген), CFP-10 (culture filtrate protein – білок клітинного фільтрату) і пептид, який кодується RD 11 – TB7.7 (p4). Зазначені антигени відсутні в вакцинних штамах M. bovis BCG і у більшості нетуберкульозних мікобактерій (за винятком M. kansasii, M. szulagai, M. marinum), чим досягається висока специфічність показань тесту.
Переваги дослідження:
- висока специфічність і чутливість;
- відсутність протипоказань;
- відсутність побічних реакцій;
- результат не залежить від попередньої вакцинації BCG.
- Обмеження дослідження:
- квантіфероновий тест не дозволяє диференціювати латентний і активний туберкульоз;
- величина рівня гамма-інтерферону не корелює зі стадією і ступенем інфікування, рівнем імунної реактивності або ймовірністю переходу латентного туберкульозу в активний;
- не використовується для моніторингу відповіді на лікування ЛТИ.
Негативні результати тестів in vitro при відсутності клінічних симптомів захворювання (респіраторного і інтоксикаційного характеру, інших локальних патологічних проявів) дозволяють лікарю-фтизіатра видати довідку про відсутність у дитини зараз активного туберкульозу. Специфічність і чутливість даного методу не досягає 100% і може варіювати у літніх людей, дітей молодше 5 років і осіб з імунодефіцитом.
- Васильєва Е.В., Лапін С.В., Блінова Т.В., Нікітіна І. Ю., Лядова І.В., Вербів В.Н., Тотолян А.А. Порівняльна цінність квантіферонового тесту, неоптерину специфічних протитуберкульозних антитіл для клініко-лабораторної діагностики туберкульозу легенів. Клінічна лабораторна діагностика. 2013; 5: 21-26.
- Клінічні рекомендації «Виявлення та діагностика туберкульозу у дітей, що надходять і навчаються в освітніх організаціях». 2017: 33.
- Корнєва Н.В., Старшинова А.А., Овчинникова Ю.Е., Потапенко О.І., Якунова О.А., Довгалюк І.Ф. Імунологічні показники при різній активності туберкульозної інфекції у дітей. Медична імунологія. 2014; 16 (5): 425-430.
- Кривохижа В.Н., Королюк А.М. Латентна туберкульозна інфекція у дітей: діагностика, лікування, спостереження. 2016: 562-564.
- Мордовська Л.І., Аксьонова В.А., Володимирський М.А., Аксьонова Є.І., Єфремов Е.Е., Власик Т.Н. Кількісний аналіз індукції інтерферону γ клітинами цільної крові IN VITRO в присутності антигенів мікобактерій туберкульозу. Педіатрія. 2009 року; 88 (5): 43-46.
- Нові технології в діагностиці туберкульозу: Квантіфероновий тест (QuantiFERON®-TB Gold IT). Головний лікар, фтизіатрія. 2013; 1 (32): 55-58.
- Толемісова А.М., Сидоренко О.А., Балмахаева Р.М., Бекбенбетова З.С., Смагулова Н.К. Квантіфероновий тест в діагностиці туберкульозу. Вісник КазНМУ. 2015; 1: 330-332.
- Матеріали фірми-виробника реагентів (QIAGEN).
Іммунодіагностіка туберкульозу: Т-Спот і Квантіфероновий тест
- Після первинного контакту з мікобактеріями туберкульозу (інфікування) хвороба може перейти на следующии стадію і тоді розвинеться латентна туберкульозна інфекція (ЛТИ).
- ЛТИ – це ще не хвороба, але її наявність – фактор підвищеного ризику розвитку активної форми туберкульозу (хвороби).
- Зовні це абсолютно здорові люди!
- За оцінками, у 10% імунокомпетентних осіб з ЛТИ й протягом життя розвивається туберкульоз.
- Приблизно у половини цих людей захворювання на туберкульоз розвивається протягом перших двох років після зараження,
- У другої половини туберкульоз може розвинутися протягом життя.
Ризик прогресування від туберкульозної інфекції до туберкульозного захворювання підвищується у осіб з ослабленою імунною системою.
Завдання скринінгу на туберкульоз – вчасно виявити ці 10% людей, у яких відбувся перехід від простого інфікування до ЛТИ і призначити їм профілактичне лікування, щоб не допустити переходу до стадії хвороби. Близько 2 мільярдів чоловік в світі мають ЛТИ, але тільки у 10 млн в рік є ризик захворіти на туберкульоз.
Проба Манту в скринінгу і діагностики
Якщо ви уважно прочитали статтю про пробу Манту, то знаєте, що туберкулін, застосовуваний для проведення проби Манту – це суміш безлічі антигенів людських (M. tuberculosis) і бичачих (M.bovis) мікобактерій, а вакцина БЦЖ – це пра-пра-правнучка M.bovis.
Склавши докупи ці два факти ми отримуємо основний недолік проби Манту:
вона добре справляється із завданням динамічного скринінгу, але гірше підходить для миттєвої діагностики, тому що може давати (+) реакцію у більшості щеплених БЦЖ
У країнах, де немає масової вакцинації БЦЖ, пробою Манту користуватися набагато зручніше, не тільки як скринінгових методом, а й діагностичним . Але ось біда – саме там вона не потрібна масово, тому що
в цих країнах зовсім інший рівень захворюваності на туберкульоз і поголовний скринінг просто не потрібен, тільки груп ризику і то не скрізь. А там де масовий скринінг необхідний (через високу поширеність туберкульозу та високого ризику зараження) – всіх прищеплюють БЦЖ (рівно з тієї ж причини).
У цих країнах продовжує залишатися актуальним питання диференціювання поствакцинальних і Постінфекційний чутливості до туберкуліну.
Ще один недолік проби Манту полягає в тому, що з її допомогою ми найчастіше не можемо провести межу між інфікуванням і латентною туберкульозною інфекцією (ЛТИ).
Нова сторінка в історії
На початку 2000-х з’явилася нова технологія иммунодиагностики туберкульозу – Interferon-gamma release assays (IGRAs) – “тест вивільнення гамма-інтерферону”.
Для проведення такого тесту потрібно забір крові з вени і її дослідження в лабораторії під впливом мікобактеріальних антигенів. По суті, ми добиваємося такої ж реакції, як при проведенні проби Манту, тільки поза організмом і з деякими важливими відмінностями:
1. На відміну від туберкуліну, що застосовується для проведення ПМ, в IGRA-тестах для активації лімфоцитів застосовують суміш з декількох вибіркових антигенів (2 або 3 шт, в залежності від тесту). Ці антигени були вибрані тому, що вони не зустрічаються в вакцинних штамах БЦЖ і не властиві більшості не туберкульозного мікобактерій, але присутні у збудника ТБ людини (M. tuberculosis) і інших микобактериях “туберкульозного комплексу” (M.bovis, M.africanum, M. microti, M.canetti), потенційно патогенних для людини. 2. Ще однією важливою відмінністю цих тестів від ПМ є те, що вони виявляють реакції, властиві тільки особам з наявністю “активованого” інфекційного процесу починаючи з ЛТИ, не зачіпаючи найпершу стадію – інфікування. Уявіть, що ви купили сім-карту і забули про неї. Ніхто не знає, що вона у вас є.А якщо ви її активували і почали дзвонити з цього номера (не важливо, один дзвінок був, або 1000), це вже можна відстежити. Так само і тут.
Механізм роботи IGRA-тесту
В організмі, в якому є інфекційний ТБ процес, викликаний M.tuberculosis, Т-лімфоцити під впливом мікобактеріальних антигенів (МБА), специфічних для цього збудника, починають виділяти гамма-інтерферон (IFNγ).
В організмі, де ТБ процесу немає, такої реакції НЕ БУДЕ.
Ця методика не дозволяє встановити факт інфікування . Тільки наявність “активованої” інфекції, починаючи зі стадії ЛТИ.
Щоб цю реакцію “засікти”, потрібно
- – взяти кров пацієнта з життєздатними імунними клітинами
- – виділити з неї лімфоцити
- – додати до них МБА і залишити на якийсь час, щоб сталася реакція
- – подивитися, чи почнуть Т-лімфоцити виділяти IFNγ
Т-спот – одна з різновидів методики ELISpot
В росії є 2 види igra-тестів:
- QuantiFERON [Квантіферон] – рег.в РФ в 2010
- T-SPOT.TB [Т-спот] – рег.в РФ в 2012
Хоча вони і засновані на одному принципі, але мають відмінності в методиці детекції:
T-SPOT – проводиться підрахунок кількості клітин, які виділяють IFNγ. Підрахунок ведуть по забарвити “відбитками” лімфоцитів на дні лунки, де відбувалася інкубація.
QuantiFERON – визначають кількість (концентрацію) IFNγ в досліджуваному зразку.
Коли я готувала цей матеріал у мене склався пазл! Ця різниця в методах закладена прямо в їхніх назвах! Відбитки = плями = spot. А “Т” – це “Т-лімфоцит”. Тобто T-SPOT = буквально “відбиток Т-лімфоцити”. QuantiFERON – від “Quanti” – “кількість” і “FERON” – інтерферон
Ще однією важливою відмінністю є точка контакту клітин крові з антигенами:
T-SPOT.TB – Забір крові проводиться в звичайну пробірку. Її доставляють в лабораторію і вже там проводять інкубацію з МБА.
QuantiFERON – при застосуванні наборів останнього покоління (QuantiFERON Golg in Tube) pабор крові здійснюється в спеціальні пробірки (кілька штук), в які ВЖЕ містять МБА, + пробірки з позитивним і негативним контролем. Так що контакт з МБА починається відразу.
Зверніть увагу, що дані тести не виявляють самі мікобактерії як такі, а тільки ознаки їх активності. А ще не дають відповіді ДЕ саме в організмі (в легенях, нирках, кишечнику …), тому також як і шкірні проби повинні оцінюватися в комплексі з іншими методами діагностики.
Плюси igra-тестів
Висока специфічність і відсутність перехресної реакції у щеплених БЦЖ- Більш об’єктивна оцінка результатів (в порівнянні з шкірними пробами)
- Чи не потрібен окремий візит до лікаря для оцінки результату, як при шкірній пробі
- Підходить для осіб з абсолютними протипоказаннями до проведення шкірних проб
Мінуси igra-тестів
Потрібно забір крові з вени Для маленьких дітей це є серйозним лімітуючим фактором. Для квантіферонового тесту крові потрібно БАГАТО (3-4 пробірки). Для Т-споту – менше (одна пробірка). Наприклад, якщо батьки проти щеплень і шкірних тестів, то їм потрібно 2 рази в рік брати у дитини кров з вени починаючи з 6-місячного віку …
Вартість Це дуже дорогі дослідження, і не тільки в Росії. На сьогодні Квантіфероновий тест в СПб з забором матеріалу – 6000р, Т-спот 8000р. Для масового скринінгу можуть застосовуватися тільки в країнах з дуже високим рівнем доходу.
Логістика – Температура транспортування та зберігання.
Як вже озвучила в описі методики, для виконання аналізу потрібна кров з живими клітинами! Порушення температурного режиму (+ 18- +25) може привести до того, що матеріал буде зіпсований і аналіз недостовірний.
Для Т-Спот це принципово, тк контакт з антигенами відбувається вже після транспортування. Це може привести до хибно-негативного результату! – Зразки крові повинні бути проаналізовані через 8-24 годин після забору (для T-spot – 32 години).
Спеціальне лабораторне обладнання, навчений персонал. Для проведення шкірних проб не потрібно спеціального устаткування, маніпуляція здійснюється медичним персоналом. Для проведення IGRA-тестування потрібно набагато більше.
Тому в Росії існує всього близько 50 лабораторій, які можуть самостійно їх виконувати. У більшості місць відбувається тільки забір крові, а виконання здійснюється за договором в іншому місці, частіше у великій комерційній профільної лабораторії в Москві ..
Для батьків цей пункт не має великого значення, це, скоріше, до питання доступності та дотримання попереднього пункту, якщо мова йде про віддалений від центру регіоні.
Для країн з низьким рівнем доходів рекомендації ВООЗ такі:
“IGRA дорожчий і технічно складний процес, ніж проба Манту. З огляду на яку можна порівняти продуктивність, але підвищену вартість, заміна проби Манту на IGRA-тести як метод скринінгу в умовах обмежених ресурсів не рекомендується.
Комерційні IGRA-тести схвалені FDA як непрямі і додаткові тести на інфекцію ТБ в поєднанні з оцінкою ризику, рентгенографией і іншими медичними і діагностичними оцінками.
Існує кілька міжнародних керівництв по їх використанню в країнах з високим рівнем доходу “. [1]
Що говорить з приводу IGRA-тестів Medscape?
Дослідження, що оцінюють показники IGRA у дітей, мізерні.
Невизначені результати для дітей є потенційним обмеженням для впровадження IGRA в клінічну практику.
Частота невизначених результатів IGRA у дітей різна (діапазон 0-17%), і більшість з них пов’язані з низьким рівнем реакції на стимуляцію мікобактеріальній антигенами в результаті недостатньої імунологічної зрілості. Невизначені результати аналізу QFT-InTube частіше зустрічаються серед дітей младшегоовозраста.
Труднощі в зборі крові для цих аналізів і потреба у відносно великому обсязі крові у маленьких дітей (особливо у немовлят) також є обмеженнями. [2]
З інструкції до набору Т-Спот
Ефективність тесту T-SPOT.TB була адекватно оцінена із зразками від осіб молодше 17 років, у вагітних жінок і у пацієнтів з гемофілією [3]. Але ж як правило бажання вдіяти не Манту, а такий тест є у батьків МАЛЕНЬКИХ дітей.
Протипоказання
ДУЖЕ засмучує інформація з рунета, сильно спотворює відомості про ці тестах в позитивну сторону, і замовчуючи про недоліки. Особливо впадає в око те, що у цих тестів нібито взагалі немає протипоказань і ніщо не впливає на результати тесту. Як так? В організмі впливає, а в пробірці не впливає? Клітини ті ж самі, тільки їх дістали.
У західних джерелах інформація більше схожа на правду. CDC рекомендує дотримуватися не менше 4-6 тижнів інтервалу між живими ін’єкційними вакцинами (КПК, Вітряна віспа) і проведенням цього тесту.
Після перенесеного кору, краснухи, паротиту та вітрянки, відповідно, теж! Так що в разі планової вакцинації живими ін’єкційними вакцинами стОит робити забір крові до вакцинації або в один день зі щепленням. [3]
висновки
IGRA-тести – це не панацея. У них є свої переваги і свої недоліки. У них теж бувають помилково (+) і помилково (-) результати.
Це не повні аналоги проби Манту (не виявляються стадію інфікування) і малоймовірно, що найближчим часом в Росії або країнах пострадянського простору стануть застосовуватися в якості методу скринінгу ТБ. Тільки як додатковий метод діагностики.
Хоча, завдяки локалізації виробництва в Росії ціна на T-SPOT.TB найближчим часом може бути знижена, а тест стане доступний по ОМС для осіб з реальними протипоказаннями до проведення шкірних проб. Наведу аналогію.
Якщо вам потрібно просто перевезти з точки А в точку Б 100 чоловік, то оптимально буде найняти автобус. Якщо у вас 10 чоловік, то вам вистачить маршрутки. А якщо потрібно терміново доставити потерпілого в лікарню, то машина швидкої допомоги. Для різних завдань різні рішення є кращими.
Якщо я відмовляюся від проведення проб реакції Манту або Діаскін-тесту моїй дитині, які інші методи ранньої діагностики туберкульозу в даний час є?
При відмові батьків дитини від проведення внутрішньошкірних проб на туберкульозну інфекцію, можливе призначення альтернативних методів обстеження з метою виключення туберкульозу у дитини.
До таких методів обстеження належать такі діагностичні тести: квантіфероновий тест (QuantiFERON-TB Gold) і тест T-SPOT.TB. В обох випадках для проведення дослідження здійснюється забір крові з вени.
Позитивні результати тестів вказують на активність туберкульозної інфекції і припускають призначення додаткового обстеження для виключення локального туберкульозу.
Негативні результати тестів in vitro при відсутності клінічних симптомів захворювання дозволяють лікарю-фтизіатра видати довідку про відсутність у дитини зараз активного туберкульозу. (З сайту уряду СПБ) [7]
1 Рекомендації ВООЗ щодо застосування IGRA тестів в країнах з низьким рівнем доходів
2 Рекомендації MedScape про застосування QuantiFERON-TB тесту (QFT), QuantiFERON-TB Gold тесту (QFT-G), QuantiFERON-TB Gold In-Tube тесту (QFT-GIT), і T-SPOT.TB тесту (T-Spot) .
- 3 T-SPOT.TB – інструкція із застосування (оригінал)
- 4 QuantiFERON-TB Gold Plus – опис методу (російською)
- 5 QuantiFERON-TB Gold Plus – Інструкція по застосуванню (оригінал)
- 6 Презентація ВООЗ про QuantiFERON-TB Gold Plus
- 7 Які методи дослідження годяться, якщо я хочу відмовитися від проби Манту і Діаскінтест? (Сайт уряду СПБ)
